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Accucore液相色譜柱的安裝有什么技巧嗎?

更新時(shí)間:2016-05-26      瀏覽次數(shù):2184
  
  
  Accucore液相色譜柱安裝技巧不多,只要接頭和柱頭匹配,確實(shí)擰緊不漏就可以了,但也要注意不要擰得太緊以至于損傷螺紋。
  
  所謂死體積就是*不保留的物質(zhì)出峰時(shí)從進(jìn)樣到流過(guò)色譜柱的總體積,一般用極性非常強(qiáng)的尿嘧啶的出峰來(lái)測(cè)定。死體積包括柱體積(色譜柱內(nèi)溶劑能占據(jù)的空腔體積)和柱外體積兩部分。你從廠商這里買到色譜柱,柱體積已經(jīng)是固定了,你能盡量避免減少的是柱外體積。進(jìn)樣器內(nèi)死體積、毛細(xì)管長(zhǎng)度、毛細(xì)管和色譜柱連接緊湊與否,保護(hù)柱或在線濾器產(chǎn)生的死體積大小,都對(duì)這個(gè)有影響。樣品在柱內(nèi),除擴(kuò)散外,還有和填料作用引起的組分分離;但樣品在柱外,那就只有擴(kuò)散這個(gè)使柱效下降的因素了。所以,要取得好的分離效率,柱外體積應(yīng)該是越小越好。
  
  Accucore液相色譜柱峰有時(shí)候前延,有時(shí)候拖尾,一般不是色譜柱的問(wèn)題,應(yīng)該是樣品和色譜柱填料的作用問(wèn)題,可以說(shuō)如果色譜柱類型選擇沒(méi)問(wèn)題,關(guān)鍵就是色譜條件的選擇。包括進(jìn)樣量、樣品溶劑、流動(dòng)相組成(包括添加劑)、流動(dòng)相pH以及柱溫,都對(duì)峰形有影響。另外測(cè)定分子量較大的多肽,用樣品老化平衡色譜柱很重要,分子量越大的物質(zhì),需要平衡時(shí)間越長(zhǎng)。如果柱子沒(méi)平衡好,峰形也可能會(huì)不正常。所以把你具體的測(cè)定條件也列一下,也便于有針對(duì)性的分析原因。
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